纤维连接蛋白原料的制备是生物技术与工业生产的结合典范。目前主流工艺采用动物血源提取法：以健康牛血浆为原料，经冷乙醇沉淀去除杂蛋白，通过亲和层析（如肝素 - 琼脂糖凝胶）富集目标蛋白，最终经超滤浓缩和冻干得到高纯度（≥98%）原料。此工艺需严格控制 pH（7.2-7.4）和温度（4-8℃），避免蛋白变性，最终产品活性应≥1×10⁵ U/mg。​

随着基因工程技术发展，重组人纤维连接蛋白（rhFN）成为新趋势。通过构建 pET-28a 载体转染大肠杆菌，诱导表达后经镍柱纯化，可获得无动物源污染的重组蛋白，其氨基酸序列与天然人纤连蛋白完全一致，内毒素含量＜0.1EU/mg，满足高端医疗领域需求。原料质量控制需通过 SDS-PAGE 电泳（分子量 250kDa 特征条带）、HPLC 纯度分析（主峰占比≥95%）及细胞黏附实验（细胞贴壁率≥90%），确保生物活性稳定。