纤维连接蛋白的制备技术与质量控制

目前主流制备方法包括：

• 动物源提取：从猪血或牛血清中分离，需历经冷沉淀、离子交换层析、亲和层析等步骤，纯度可达 95% 以上，但存在 BSE/TSE 病毒污染风险，欧美已逐步限制使用。
• 重组表达：利用大肠杆菌或 CHO 细胞表达系统，通过密码子优化技术提升 rhFN 表达量（可达 1g/L 培养物），结合亲和纯化与超滤浓缩，最终产品内毒素≤0.1EU/mg，符合 USP 标准。

质量核心指标：

• 活性检测：采用细胞黏附试验，要求在 5μg/cm² 包被浓度下，HUVEC 细胞黏附率≥85%。
• 纯度分析：SDS-PAGE 电泳显示主条带清晰，杂蛋白含量≤2%；HPLC-SEC 测定分子量分布均一性，多分散指数（PDI）≤1.2。